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線粒體容積變化是衡量線粒體活性的基本參數(shù)。線粒體應對細胞對于藥物、凋亡誘導、細胞周期變化等反應采取的活性變化，包括膜電位、氧消耗、以及膜通道孔（mitochondrial permeability transition pore；MPTP）功能等的改變。線粒體基質容量（mitochondrial matrix volume）成為檢測線粒體活性和功能的指標。一旦各種因素包括凋亡刺激、活性氧影響導致線粒體膜通道孔開放或膜電位的消失，而導致線粒體容積增大，即線粒體膨脹（mitochondrial swelling），使線粒體的光散射性（light scattering）降低，通過分光光度儀520nm波長的吸光峰值的變化，定量分析線粒體的膨脹程度。該波長區(qū)域可以避免細胞色素和蛋白質的干擾。
產品內容
HEPENGBIO緩沖液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO膨脹液（Reagent B） 微升
產品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里，有效保證6月
用戶自備
比色皿96孔板：用于線粒體光度分析的容器
分光光度儀或酶標儀：用于線粒體光度定量分析
實驗步驟
實驗開始前，開啟并設定好分光光度儀（溫度為25℃）：波長520nm，間隔30秒測讀1次，持續(xù)10分鐘至30分鐘，并置零
一、 樣品膨脹度檢測
1． 準備好待測的純化線粒體樣品：對照樣品和處理樣品
2． 分別移取20微升線粒體樣品（總量為200微克）到比色皿或96孔板的對應孔里
3． 分別加入xx微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
4． 即刻放進分光光度儀或酶標儀（波長520nm）：獲得0分鐘初始讀數(shù)
5． 動態(tài)測讀1分鐘或室溫下靜置1分鐘
6． 即刻分別加入xx微升HEPENGBIO膨脹液（Reagent B）
7． 即刻放進分光光度儀或酶標儀（波長520nm）：動態(tài)記錄10分鐘吸光值變化或設定時間點記錄實際吸光值
8． 獲得實際吸光讀數(shù)：0分鐘讀數(shù)-10分鐘吸光讀數(shù)――實際吸光讀數(shù)高，表明線粒體膨脹度高
9． 或構建線粒體膨脹-藥物濃度關系曲線：縱座標（Y）為實際吸光讀數(shù)，橫座標（X）為藥物濃度
二、誘導劑篩選檢測
1． 準備好待測的純化線粒體樣品
2． 移取20微升線粒體樣品（總量為200微克）到比色皿或96孔板的對應孔里
3． 加入xx微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
4． 即刻放進分光光度儀或酶標儀（波長520nm）：獲得0分鐘初始讀數(shù)
5． 動態(tài)測讀1分鐘或室溫下靜置1分鐘
6． 即刻加入10微升用戶自備的待測誘導劑，混勻（注意：可以設定不同濃度梯度）
7． 即刻放進分光光度儀或酶標儀（波長520nm）：動態(tài)記錄10分鐘吸光值變化或設定時間點記錄實際吸光值――吸光值降低，表明誘導劑作用增強
8． 構建線粒體膨脹誘導曲線：縱座標（Y）為實際吸光值 ，橫座標（X）為時間（分鐘）
9． 或構建線粒體膨脹-誘導劑濃度關系曲線：縱座標（Y）為實際吸光值，橫座標（X）為誘導劑濃度
三、抑制劑篩選檢測
1． 準備好待測的純化線粒體樣品
2． 移取20微升線粒體樣品（總量為200微克）到比色皿或96孔酶標板的對應孔里
3． 加入xx微升室溫預熱的HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
4． 即刻放進分光光度儀或酶標儀（波長520nm）：獲得0分鐘初始讀數(shù)
5． 動態(tài)測讀1分鐘或室溫下靜置1分鐘
6． 加入10微升用戶自備的待測抑制劑，混勻（注意：可以設定不同濃度梯度）
7． 動態(tài)測讀2分鐘或室溫下靜置2分鐘
8． 即刻加入xx微升HEPENGBIO膨脹液（Reagent B），混勻
9． 即刻放進分光光度儀或酶標儀（波長520nm）：動態(tài)記錄10分鐘吸光值變化或設定時間點記錄實際吸光值――吸光值不變，表明抑制劑作用增強
10． 或構建線粒體膨脹-抑制劑濃度關系曲線：縱座標（Y）為實際吸光值，橫座標（X）為抑制劑濃度
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線粒體容積變化是衡量線粒體活性的基本參數(shù)。線粒體應對細胞對于藥物、凋亡誘導、細胞周期變化等反應采取的活性變化，包括膜電位、氧消耗、以及膜通道孔（mitochondrial permeability transition pore；MPTP）功能等的改變。線粒體基質容量（mitochondrial matrix volume）成為檢測線粒體活性和功能的指標。一旦各種因素包括凋亡刺激、活性氧影響導致線粒體膜通道孔開放或膜電位的消失，而導致線粒體容積增大，即線粒體膨脹（mitochondrial swelling），使線粒體的光散射性（light scattering）降低，通過分光光度儀520nm波長的吸光峰值的變化，定量分析線粒體的膨脹程度。該波長區(qū)域可以避免細胞色素和蛋白質的干擾。
產品內容
HEPENGBIO緩沖液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO膨脹液（Reagent B） 微升
產品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里，有效保證6月
用戶自備
比色皿96孔板：用于線粒體光度分析的容器
分光光度儀或酶標儀：用于線粒體光度定量分析
實驗步驟
實驗開始前，開啟并設定好分光光度儀（溫度為25℃）：波長520nm，間隔30秒測讀1次，持續(xù)10分鐘至30分鐘，并置零
一、 樣品膨脹度檢測
1． 準備好待測的純化線粒體樣品：對照樣品和處理樣品
2． 分別移取20微升線粒體樣品（總量為200微克）到比色皿或96孔板的對應孔里
3． 分別加入xx微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
4． 即刻放進分光光度儀或酶標儀（波長520nm）：獲得0分鐘初始讀數(shù)
5． 動態(tài)測讀1分鐘或室溫下靜置1分鐘
6． 即刻分別加入xx微升HEPENGBIO膨脹液（Reagent B）
7． 即刻放進分光光度儀或酶標儀（波長520nm）：動態(tài)記錄10分鐘吸光值變化或設定時間點記錄實際吸光值
8． 獲得實際吸光讀數(shù)：0分鐘讀數(shù)-10分鐘吸光讀數(shù)――實際吸光讀數(shù)高，表明線粒體膨脹度高
9． 或構建線粒體膨脹-藥物濃度關系曲線：縱座標（Y）為實際吸光讀數(shù)，橫座標（X）為藥物濃度
二、誘導劑篩選檢測
1． 準備好待測的純化線粒體樣品
2． 移取20微升線粒體樣品（總量為200微克）到比色皿或96孔板的對應孔里
3． 加入xx微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
4． 即刻放進分光光度儀或酶標儀（波長520nm）：獲得0分鐘初始讀數(shù)
5． 動態(tài)測讀1分鐘或室溫下靜置1分鐘
6． 即刻加入10微升用戶自備的待測誘導劑，混勻（注意：可以設定不同濃度梯度）
7． 即刻放進分光光度儀或酶標儀（波長520nm）：動態(tài)記錄10分鐘吸光值變化或設定時間點記錄實際吸光值――吸光值降低，表明誘導劑作用增強
8． 構建線粒體膨脹誘導曲線：縱座標（Y）為實際吸光值 ，橫座標（X）為時間（分鐘）
9． 或構建線粒體膨脹-誘導劑濃度關系曲線：縱座標（Y）為實際吸光值，橫座標（X）為誘導劑濃度
三、抑制劑篩選檢測
1． 準備好待測的純化線粒體樣品
2． 移取20微升線粒體樣品（總量為200微克）到比色皿或96孔酶標板的對應孔里
3． 加入xx微升室溫預熱的HEPENGBIO緩沖液（Reagent A），混勻
4． 即刻放進分光光度儀或酶標儀（波長520nm）：獲得0分鐘初始讀數(shù)
5． 動態(tài)測讀1分鐘或室溫下靜置1分鐘
6． 加入10微升用戶自備的待測抑制劑，混勻（注意：可以設定不同濃度梯度）
7． 動態(tài)測讀2分鐘或室溫下靜置2分鐘
8． 即刻加入xx微升HEPENGBIO膨脹液（Reagent B），混勻
9． 即刻放進分光光度儀或酶標儀（波長520nm）：動態(tài)記錄10分鐘吸光值變化或設定時間點記錄實際吸光值――吸光值不變，表明抑制劑作用增強
10． 或構建線粒體膨脹-抑制劑濃度關系曲線：縱座標（Y）為實際吸光值，橫座標（X）為抑制劑濃度
